常规 HIV抗体检测方法
发布时间：2019年06月26日
一、筛查方法
1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）
这类试验可使用血液（包含血清、血浆和滤纸干血斑）、尿液样品，ELISA多为HIV抗体检测试剂。HIV抗原抗体联合检测试剂可同时检测血液中 HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗体。HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶标记的 HIV抗原/抗体，加底物显色，用酶标仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。
2. 化学发光或免疫荧光试验（CIA/IFA）
这类试验采用发光或荧光底物，可使用血液(包含血清和血浆)、尿液样品，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体。HIV抗原/抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光标记的 HIV抗原/抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。
3. 快速检测（RT）及其它试验
这类试验可使用血液、口腔黏膜渗出液，操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测、VCT及检测点等。一般可在 10～30分钟内得出结果。
明胶颗粒凝集试验（PA）：是 HIV抗体检测的一种简便方法。将 HIV抗原致敏的明胶颗粒，与待检样品作用。当待检样品含有 HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。PA试剂有两种:同时检测 HIV-1和 HIV-2抗体以及分别检测 HIV-1和 HIV-2抗体。有效试验的阴性和阳性对照质控，需符合试剂盒的规定。
免疫渗滤试验：斑点 ELISA和斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验：均以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状或线状固定在膜上，加待检样品，利用微孔滤膜的可滤过性，使抗原抗体反应。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点或条带。反应时间在 10分钟以内。有效试验的质控点必须显色。
免疫层析试验：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，待检样品沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。反应时间在 30分钟以内。
二、抗体确认方法
1. 免疫印迹试验（WB）
WB可使用血清、血浆和滤纸干血斑。WB采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2特异性抗体。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1蛋白分离开来，然后再把这些分离的不同蛋白带转移到硝酸纤维素膜上（或 PVDF膜）。将此膜切割成条状，每一膜条上均含有经电泳分离过的 HIV抗原。待测样品经适当稀释后，加至硝酸纤维素膜上，恒温震荡，使其充分接触反应，血清中若含有 HIV抗体，就会与膜条上抗原带相结合。加入抗人-IgG酶结合物和底物后，根据出现条带情况，按照试剂盒说明书判定标准，判断待测样品为阳性、阴性或不确定。
2. 条带/线性免疫试验（RIBA/LIA）
RIBA/LIA采用间接法检测样品中的抗 HIV-1/HIV-2特异性抗体。试剂盒的膜条上包被有 HIV-1/HIV-2不同的重组抗原片段，加入待测样品后，其中的相应抗体与抗原发生特异性的免疫反应；随后加入抗人 IgG（碱性磷酸酶标记）与 HIV特异性 IgG抗体相结合；加入显色底物后，在碱性磷酸酶的催化下，特异性抗体的结合部位出现肉眼可见的条带,按照试剂盒说明书判定标准，判断待测样品为阳性、阴性或不确定。
3. 其他方法：
可用于确证的特定条件下的三种酶联免疫、三种快速试验或酶联加快速试验，免疫层析和免疫渗滤试验。